1. <video id="63yr9"></video>
    2. <video id="63yr9"></video>
      <wbr id="63yr9"><ins id="63yr9"></ins></wbr>
          <wbr id="63yr9"><ins id="63yr9"></ins></wbr>
          <video id="63yr9"><ins id="63yr9"><dl id="63yr9"></dl></ins></video>
          1. 武漢邁斯普生物科技有限公司

            自有實驗平臺  真實 高效 品質化科研服務

            訂購電話:

            027-87002769

            掃碼即可咨詢下單

            網站首頁 >> 送樣需知 >>送樣須知 >> 細胞透射電鏡取材實驗注意事項
            详细内容

            細胞透射電鏡取材實驗注意事項

            1、細胞樣品取材原則:

              細胞樣品結構簡單,一般分為懸浮培養及貼壁培養。貼壁培養建議使用6cm-10cm的培養皿培養,這樣有足夠的細胞量且方便操作。取材前,先查閱文獻,明確實驗目的,設計好實驗流程,熟悉超微結構及分布,對需要觀察的結構及特點需要有自己的判斷,根據不同的實驗目的,制定取材計劃。另外,戊二醛會影響抗原活性,如果課題需要做免疫性的實驗,取材時需要用不同的固定液固定。固定對取材用器材及試劑,進行清潔及預冷,寫好取材的標簽。取材時,務必做到相同條件下取材,相同人員平行操作。固定液一般為2.5%電鏡專用戊二醛。

            2、取材器材與試劑:

              冰盒、EP管、2.5%戊二醛、封口膜、吸管。均4度預冷備用。

            3、細胞取材操作方法:

              3.1刮:將狀態良好,處理完畢的細胞。連著培養液直接用細胞刮刀沿培養皿邊緣由一個方向一次性刮下,不要反復來回刮,也不要用胰酶消化。反復來回刮會導致細胞損傷嚴重,結構被破壞。消化法更是會造成整體細胞結構改變,自噬假陽性、破壞細胞間緊密連接、線粒體損傷等。懸浮細胞可以理解為刮下的細胞懸液。

              3.2離:對細胞狀態,觀察的結構及過程要有大概了解。常規自噬、線粒體等觀察直接刮下后轉移到15ml離心管中,1000-3000rpm低速離心,目的是富集細胞。轉速越低越好,時間越短越好。期間對于凋亡、壞死等實驗,取材時,需要將細胞上清中漂浮的細胞或碎片收集。很有可能這些漂浮的細胞及碎片是凋亡、壞死程度較高,超微結構最為典型的。

              3.3洗:刮下細胞后,需要用PBS將細胞洗2次,主要目的是去除殘留的培養基,提高成像效果,但這個過程不是必須的。在這個過程中,細胞處于饑餓狀態,操作一定要迅速,對于敏感的細胞(神經元、心肌細胞等),可以不洗。否則會導致結構改變。

              3.4:全程4℃操作、保存、送樣。盡量在低溫下操作,降低水解酶的活性,所用容器和器械應預冷,取好的標本放在4冰箱保存。

             


            seo seo
            免费在线观看av_亚洲性爱无码_亚洲无码福利_国产午夜精品在线观看
            1. <video id="63yr9"></video>
            2. <video id="63yr9"></video>
              <wbr id="63yr9"><ins id="63yr9"></ins></wbr>
                  <wbr id="63yr9"><ins id="63yr9"></ins></wbr>
                  <video id="63yr9"><ins id="63yr9"><dl id="63yr9"></dl></ins></video>